Efeito dos campos magnéticos no crescimento e viabilidade do tumor
Resumo
O câncer de mama é o câncer não cutâneo mais comum e é a segunda principal causa de mortes relacionadas ao câncer em mulheres. A maioria dos métodos de intervenção envolve combinações de cirurgia, quimioterapia e radiação ionizante. Tanto a quimioterapia quanto a radiação ionizante podem ser eficazes contra muitos tipos de câncer, mas também prejudicam tecidos normais. O uso de campos magnéticos não ionizantes mostrou-se promissor em vários estudos in vitro e em animais. Nosso estudo testou o efeito de durações variadas de exposição magnética no crescimento e viabilidade do tumor em camundongos injetados com células de câncer de mama. As células cancerosas foram marcadas por meio da expressão estável da luciferase do vaga-lume para monitoramento do crescimento e progressão do tumor usando um sistema de imagem in vivo. Nós hipotetizamos que a exposição ao campo magnético influenciaria o crescimento e a progressão do tumor. Nossos resultados mostraram que a exposição dos camundongos a campos magnéticos por 360 minutos diariamente por até 4 semanas suprimiu o crescimento do tumor. Nosso estudo é único por usar um sistema de imagem in vivo para monitorar o crescimento e a progressão dos tumores em tempo real em camundongos individuais. Nossas descobertas apoiam uma exploração mais aprofundada do potencial dos campos magnéticos na terapêutica do câncer, seja como terapia adjuvante ou primária.
Nos Estados Unidos, o câncer de mama é o câncer não-de-pele mais comum e é a segunda principal causa de mortes relacionadas ao câncer em mulheres. Fundos significativos são alocados para pesquisa do câncer a cada ano. 1 A maioria dos métodos de intervenção envolve combinações de cirurgia, quimioterapia e/ou radiação ionizante. Mesmo quando a cirurgia é selecionada como a abordagem primária, as últimas terapias são frequentemente empregadas porque a extensão da doença é incerta ou a doença metastática é aparente. Tanto a quimioterapia quanto a radiação ionizante podem ser eficazes contra muitos tipos de câncer, mas também prejudicam ou matam tecidos normais. Devido a essa limitação, o uso de doses altas o suficiente para matar todas as células cancerosas pode ser impossível sem também produzir morbidade séria e possivelmente fatal.
O uso de campos magnéticos não ionizantes mostrou-se promissor em vários estudos in vitro e em animais, e justifica um teste bem pensado, quer tenha, em última análise, um papel como terapia adjuvante ou mesmo um papel primário em certas formas de câncer humano. 2 , 5 , 10 , 17 - 19 , 21 Uma vantagem potencial adicional é que os campos magnéticos têm o potencial de causar menos danos ao tecido normal. Nosso estudo testou o efeito dos campos magnéticos no crescimento de células cancerígenas. Investigamos vários níveis de exposição usando camundongos que foram injetados com células de câncer de mama de camundongo. As células cancerígenas foram marcadas bioluminescentemente por meio da expressão da enzima luciferase, que pode ser identificada por meio de um sistema de imagem in vivo. O crescimento e a disseminação dos tumores resultantes em camundongos inoculados foram visualizados com o sistema de imagem óptica in vivo que monitorou a progressão do tumor em um único animal em tempo real. Nossos resultados podem levar ao desenvolvimento de métodos mais novos e menos tóxicos de terapias primárias ou adjuvantes contra o câncer.
Materiais e métodos
Ratos.
O estudo foi realizado na unidade de animais credenciada pela AAALAC no Programa de Medicina Comparativa da Faculdade de Medicina da Universidade de Maryland (Baltimore, MD). Todos os procedimentos foram realizados de acordo com as diretrizes do Guia para o cuidado e uso de animais de laboratório 6 e as políticas do IACUC da unidade. Todos os procedimentos estavam em conformidade com o CDC/NIH Biossegurança em Laboratórios Microbiológicos e Biomédicos . 4 Camundongos nus fêmeas consanguíneos suíços (Cr:NIH(S)- nu/nu ; idade, 3 a 4 semanas; National Cancer Institute, Frederick, MD) foram usados neste estudo. Os camundongos foram alojados em gaiolas de microisolamento intraventiladas com cama. Ração (autoclavada) e água (hiperclorada) estavam disponíveis ad libitum para todos os camundongos durante todo o período do estudo. Um programa de vigilância estava em vigor para manter a instalação de camundongos livre de patógenos adventícios.
Células.
A linhagem de células tumorais de mama metastáticas de camundongo EpH4-MEK-Bcl2 13 foi usado. Os camundongos foram injetados através da rota da almofada de gordura mamária com 1 × 10 6 células. As células foram transfectadas com um vetor de expressão de luciferase (pβP2-PolII-luciferase) antes da injeção. As células foram cultivadas assepticamente sob condições de nível de biossegurança 2 e foram confirmadas como livres de HIV, vírus da hepatite B e C e patógenos adventícios de camundongo, como rotavírus de camundongo (diarreia epizoótica de camundongos bebês), vírus da hepatite de camundongo, parvovírus de camundongo, vírus minuto de camundongo, proteína não estrutural de parvovírus-1, vírus ectromelia, vírus da encefalomielite murina de Theiler, vírus da coriomeningite linfocítica, adenovírus de camundongo, Mycoplasma , vírus polioma, reovírus tipo 3 e vírus Sendai.
Desenho experimental.
Um total de 21 camundongos foram usados neste estudo. Para avaliar o efeito do campo magnético na saúde geral dos animais, realizamos um estudo preliminar com 9 camundongos. Os camundongos foram divididos em 3 grupos (3 camundongos por grupo) e expostos a campos magnéticos unipolares de meia onda senoidal de 100 mT, 1 Hz. Os 3 grupos foram expostos ao campo magnético diretamente diariamente por 60, 180 ou 360 min. Os camundongos foram observados para quaisquer sinais de doenças clínicas ou perda de peso. Todos os camundongos foram sacrificados no final do estudo e os tecidos coletados para análise histopatológica. Na próxima parte do estudo, os camundongos foram divididos em 4 grupos (3 camundongos por grupo). Os camundongos foram injetados com a linhagem de células de câncer de mama de camundongo EpH4-MEK-Bc12 marcada com luciferase (1 × 10 6 células suspensas em 100 μL de PBS estéril). Os camundongos no grupo de controle negativo (NCG) foram inoculados com a linhagem de células cancerígenas, mas não foram expostos a campos magnéticos. Os camundongos nos 3 grupos restantes foram expostos diariamente a campos magnéticos unipolares de meia onda senoidal de 100 mT e 1 Hz por até 4 semanas. O tempo de exposição foi de 60 min (grupo G60), 180 min (G180) ou 360 min (G360). Níveis de exposição semelhantes foram bem tolerados em experimentos anteriores. 5 , 19 Todos os camundongos foram sacrificados na semana 4 do estudo. Todos os camundongos foram alojados em uma sala que não continha a fonte magnética. Os grupos tratados foram trazidos diariamente para a sala contendo o ímã por períodos variados de tempo para exposição magnética e então retornaram para a sala de alojamento dos animais. O grupo não tratado de camundongos não foi trazido para a sala contendo o ímã. O efeito dos campos magnéticos em camundongos inoculados foi avaliado comparando os grupos expostos com o grupo não exposto.
O sistema de exposição (dispositivo magnético) usou uma bobina de Helmholtz resfriada a água acionada por uma fonte de alimentação de corrente alternada de alta potência controlável (SDR TH 40–250, Sodilec, Bordeaux, França) cuja forma de onda de saída poderia ser ajustada usando um gerador de sinal externo. As bobinas de Helmholtz tinham um diâmetro interno de 152 mm, um diâmetro externo de 406 mm e espaçamento de 83 mm. Cada bobina tinha uma resistência de 0,42 Ω. Com as bobinas conectadas em paralelo a 20 V, a corrente de acionamento nominal era próxima de 100 A e produzia um campo de corrente contínua de 0,094 T. Este instrumento foi generosamente emprestado a nós pelo Professor Bernard Veyret (Universidade de Bordeaux, França). Para as exposições relatadas aqui, a fonte de alimentação foi modulada com um gerador de onda quadrada e produziu uma forma de onda de campo magnético que era uma onda senoidal de meio ciclo unipolar. Os semiciclos tinham 0,5 s de duração com uma frequência de repetição de 1 Hz e campo de pico de 0,1 ± 0,006 T. O campo magnético foi medido usando 2 sondas diferentes (MAG-03 MC, Bartington, Witney, Reino Unido, e modelo 5180, FW Bell, Milwaukie, OR). A sonda Bell foi usada para calibrar a bobina de Helmholtz durante os testes de corrente contínua, porque ela podia registrar os grandes campos produzidos. A sonda Bartington teve uma resposta muito mais rápida e foi usada perto do ímã, mas não na região do campo de pico, para medir a variação de tempo precisa do campo. A progressão e a disseminação de tumores em camundongos inoculados foram monitoradas e medidas usando um sistema de imagem in vivo (Xenogen IVIS 200, Alameda, CA). Os tamanhos dos tumores foram medidos usando paquímetros.
Progressão do crescimento do tumor.
Os camundongos foram monitorados para crescimento tumoral uma vez a cada 2 a 4 dias ao longo de 4 semanas com imagens de bioluminescência de corpo inteiro por 2 a 3 minutos usando o sistema de imagens in vivo. Este sistema de imagens não invasivo e inovador detectou células tumorais vivas marcadas com luciferase, permitindo o monitoramento em tempo real do crescimento e disseminação do tumor nos camundongos. Para imagens, os camundongos foram sedados com 2% de isofluorano em 100% de oxigênio a 3,5 L/min (para indução) na câmara de anestesia do sistema de imagens. As imagens foram tiradas a cada 3 minutos como uma sequência de 10 imagens para cada grupo de camundongos, 2 vezes por semana para um total de 4 semanas. A progressão e disseminação dos tumores foram avaliadas pelos valores médios de radiância máxima dos tumores de camundongos inoculados. Os tamanhos dos tumores foram medidos usando paquímetros semanalmente.
Análise estatística.
Comparamos os valores médios de radiância máxima dos tumores (medidos em fótons/s/cm 2 /esferorradiano, ou seja, p/s/cm 2 /sr) de todos os grupos de camundongos usando ANOVA. Usamos testes de múltiplos intervalos de Duncan para comparar as diferenças na radiância máxima média entre os grupos. Todas as análises estatísticas foram realizadas usando SAS 9.1 (Cary, NC). O aumento médio de dobra nos valores de luminescência foi comparado usando para testes. A significância estatística foi definida como P valor menor que 0,05.
Eutanásia e avaliação patológica.
Todos os camundongos foram sacrificados por asfixia com uma overdose de gás dióxido de carbono seguido por deslocamento cervical no dia 28 (ponto final) do estudo. Os pontos finais alternativos neste estudo incluíram animais que apresentavam sinais de desconforto, como letargia, incapacidade de se mover devido ao aumento do tamanho ou localização dos tumores, desidratação, inapetência e perda de peso grave ou animais que desenvolveram ulceração dos tumores ou tinham tumores maiores que 2 cm de diâmetro. Os camundongos que apresentaram esses sinais foram sacrificados antes do ponto final do estudo. Tecidos como pele, fígado, pulmão, baço e tumores foram coletados de cada animal na eutanásia. Amostras de pele, fígado, pulmão e baço foram coletadas de camundongos no estudo preliminar, que foi conduzido para avaliar o efeito do campo magnético na saúde geral dos animais. Seções de parafina de tumores fixados em formalina foram coradas com hematoxilina e eosina e avaliadas por um patologista veterinário certificado.
Ensaio de morte celular.
Para verificar se o mecanismo de morte celular em tumores era devido à apoptose, seções de tumores embebidas em parafina foram analisadas por ensaios de marcação de extremidade de nick dUTP mediada por desoxinucleotidil transferase terminal (TdT) (TUNEL) para detectar células apoptóticas (realizados na Histoserve, Germantown, MD). Resumidamente, os blocos foram desparafinizados com xileno e etanol graduado e lavados com água destilada. As lâminas foram então tratadas com proteinase K seguida de EDTA, lavadas com água destilada e bloqueadas com albumina sérica bovina. As lâminas foram incubadas com tampão de equilíbrio a 37 °C e lavadas com tampão SSC 1×. As lâminas foram bloqueadas com albumina sérica bovina e submetidas a tratamento com antidigoxina (1:1000; catálogo nº 1093274, Roche Diagnostics, Indianapolis, IN). A cor foi revelada com fucsina, seguida de contracoloração com hematoxilina. As lâminas foram desidratadas com etanol graduado e clarificadas em solução ClearRite (Thermo Fisher Scientific, Kalamazoo, MI). As lamínulas foram montadas usando meio de montagem Permount (Fisher Scientific, Pittsburg, PA).
Resultados
Lesões tumorais macroscópicas.
O crescimento e a progressão do tumor nos grupos de controle e estudo de camundongos foram avaliados como aumento médio de dobra no valor de luminescência em comparação com a semana 1 (calculado pela normalização dos valores médios de radiância máxima). Camundongos inoculados que não foram expostos à radiação magnética (grupo NCG) tinham tumores muito grandes. Camundongos NCG tiveram um aumento de 500 vezes no crescimento do tumor na semana 4 em comparação com a semana 1. O crescimento do tumor de camundongos nos grupos G60 e G180 também mostrou aumentos robustos (900 e 200 vezes, respectivamente) na semana 4 quando comparado com a semana 1 do estudo. Em contraste, o grupo G360 mostrou apenas um aumento de 44 vezes no crescimento do tumor na semana 4 em comparação com a semana 1. Além disso, os tumores em camundongos G360 incluíam áreas extensas de necrose ( Tabela 1) . A progressão dos tumores em camundongos pertencentes aos grupos G60 e G180 não diferiu daquela dos camundongos não tratados (NCG) ( Figura 1) . Entretanto, camundongos que foram tratados com 360 min de campo magnético mostraram supressão do crescimento do tumor ( Figura 1 ). A Figura 1 também mostra uma tendência clara em direção à supressão do tumor com o aumento do tratamento com campo magnético. Figura 2 compara o crescimento e a progressão do tumor em camundongos nos diferentes grupos na semana 4. Um camundongo NCG foi sacrificado na semana 3 do estudo, pois atingiu seu ponto final alternativo para eutanásia. As medições do paquímetro indicaram que os camundongos NCG apresentaram os maiores tumores, seguidos pelos camundongos nos grupos G360, G60 e G180 (dados não mostrados).
Tabela 1.
Medidas de dobra média normalizada da radiância média máxima (p/s/cm 2 /sr) em camundongos inoculados com células de câncer de mama de camundongo
| Grupo | Semana 1 | Semana 2 | Semana 3 | Semana 4 |
| G60 | 1.0 | 5,69 | 80,58 | 979,33 |
| G180 | 1.0 | 8.16 | 51,95 | 236,48 |
| G360 | 1.0 | 9.06 | 29.40 | 44.02 |
| NCG | 1.0 | 14h25 | 206,67 | 523,53 |
Aumento da luminescência de dobra (média ± SEM comparado com o valor da semana 1) em tumores sob diferentes tratamentos de campo magnético. Os tumores em camundongos tratados por 60 min (G60) ou 180 min (G180) não diferiram significativamente daqueles em camundongos não tratados (NCG). Os camundongos tratados por 360 min (G360) mostraram ( t teste, P < 0,05) supressão do crescimento tumoral.
Crescimento e progressão tumoral em camundongos inoculados com células cancerígenas de camundongo e ( A) não exposto à radiação magnética (grupo NCG; um camundongo neste grupo teve que ser sacrificado na semana 3 e, portanto, não foi incluído no restante do estudo) ou exposto a (B) 60 min (grupo G60), (C) 180 min (grupo G180) ou (D) 360 min (grupo G360) de radiação magnética diariamente por um período de 4 semanas. As fotos foram tiradas em intervalos semanais usando o sistema de imagem in vivo.
Histopatologia.
Os tumores em todos os grupos de camundongos eram carcinomas pouco diferenciados com diferenciação mamária limitada. A maioria dos tumores tinha áreas proeminentes de necrose com infiltração de leucócitos polimorfonucleares. Os tumores no grupo G360 tinham áreas mais extensas de necrose quando comparados aos camundongos no grupo NCG ( Figura 3 ). Os ensaios TUNEL mostraram que o mecanismo de morte celular em algumas células nesses tumores pode ter sido a apoptose. Essas células exibiram núcleos fragmentados característicos de morte celular programada ( Figura 4 ). Os camundongos que não foram inoculados com células cancerígenas, mas expostos a campos magnéticos, não apresentaram nenhuma anormalidade histopatológica em seus tecidos pulmonares, hepáticos ou de pele (glândula mamária) ( Figura 5 ). Além disso, nenhum dos órgãos de nenhum dos grupos de camundongos apresentou qualquer patologia macroscópica na necropsia.
Seções de tumores [ampliação, ×20 (esquerda) e ×400 (direita)] de camundongos no grupo NCG (painel superior) e grupo G360 (painel inferior) na semana 4 do estudo. Observe as extensas áreas de necrose (N) no grupo G360 em comparação com as áreas necróticas nos tumores de camundongos NCG.
Seção de tumor de um camundongo G360 (painel direito) na semana 4. O ensaio TUNEL foi usado para revelar núcleos fragmentados (corados de vermelho e marcados com setas pretas) em células apoptóticas. Um controle positivo (painel esquerdo) mostrando células apoptóticas é exibido para comparação. Ampliação, ×200.
Discussão
Usamos camundongos nus Swiss outbred imunodeficientes em células T para investigar o efeito de campos magnéticos no crescimento e viabilidade do tumor. Nossos dados mostram que as células tumorais de mama do camundongo cresceram mais rapidamente em tumores grosseiramente visíveis no grupo não exposto de camundongos quando comparados com aqueles expostos a campos magnéticos. O sistema de imagem in vivo que usamos detecta células tumorais vivas nos vários grupos de camundongos (ou seja, mede a disseminação e a progressão dos tumores em tempo real). Os tumores foram maiores (medições do paquímetro) e cresceram mais rapidamente (resultados de imagem) em camundongos não expostos (grupo NCG). Embora os tamanhos dos tumores tenham sido comparativamente maiores em camundongos expostos a campos magnéticos por 360 minutos diariamente (grupo G360) do que naqueles expostos por 60 ou 180 minutos, os camundongos G360 mostraram reduções nas taxas de crescimento e progressão do tumor. Além disso, esse grupo de camundongos teve as áreas mais extensas de necrose, conforme evidenciado pelos dados histopatológicos. Como o sistema de imagem detecta apenas células tumorais vivas, os valores de bioluminescência dos camundongos G360 foram menores do que os dos outros grupos. Tumores em camundongos pertencentes aos grupos NCG, G60 e G180 mostraram aumentos no tamanho e crescimento do tumor quando medidos ao longo de um período de 4 semanas. Essas descobertas fornecem insights sobre os efeitos da exposição ao campo magnético no crescimento e viabilidade do tumor.
Embora as terapias direcionadas, especialmente o uso de medicamentos "de design", estejam sob investigação intensiva, a sua eficácia final ainda não foi estabelecida. 8 , 12 , 16 Estudos anteriores sobre os efeitos de redução de tumores de campos magnéticos representam uma grande variedade em sistemas de cultura de células, modelos animais (camundongos), fontes de campo, formas de onda, intensidades de campo e protocolos de exposição. Muitos dos estudos de cultura de células de linhagens tumorais relatam morte celular significativa após exposição magnética em comparação com a de culturas de controle. Com algumas exceções, a maioria dos estudos in vivo relatou uma redução relativa no tamanho do tumor em tumores expostos a campos magnéticos em comparação com os controles. 3 , 5 , 9 , 10 , 11 , 17 - 21 A redução no tamanho do tumor ocorre em uma ampla variedade de intensidades de campo, formas de onda, durações de exposição, modelos animais, linhas tumorais e outros aspectos processuais. Nenhuma teoria geral foi responsável por uma resposta tão onipresente, embora uma série de mudanças estruturais bioquímicas e celulares 3 foram bem documentados. Um relatório descreve a inibição da proliferação de células tumorais in vitro 14 na presença de um campo magnético estático.
Como os efeitos de redução de tamanho foram observados com muitas formas de onda diferentes, um objetivo importante deve ser encontrar a forma de onda com atividade ótima. Um estudo anterior 3 investigou a adição de campos magnéticos à radiação ionizante ou quimioterapia. No estudo atual, nosso objetivo geral foi encontrar um regime de exposição de campo magnético ideal que fornecesse a morte de células cancerígenas mais eficiente, ou seja, avaliar o potencial máximo dos campos eletromagnéticos em primeira instância e, então, avaliar seu papel, ao projetar estudos clínicos, seja como terapia adjuvante ou primária.
Um estudo anterior relatou que a exposição a campos eletromagnéticos terapêuticos reduziu significativamente o crescimento do tumor e a extensão da vascularização do tumor, com um aumento concomitante na extensão da necrose tumoral. 19 Os autores 19 concluiu que este tratamento reduziu com segurança o crescimento e a vascularização de cânceres de mama implantados em camundongos e que campos eletromagnéticos terapêuticos podem provar ser um adjuvante útil para aumentar o índice terapêutico da terapia convencional contra o câncer. Os resultados do nosso estudo atual estão de acordo com este estudo anterior. 19 Comparado com o nosso estudo, o estudo anterior 19 usaram exposições de campo de menor intensidade (15 e 20 mT) e períodos de exposição muito mais curtos (10 min por dia). O regime de exposição ideal permanece desconhecido. Acreditamos que exposições mais fracas e breves a campos magnéticos têm menos probabilidade de ter efeito, em comparação com exposições mais longas e fortes. Outro estudo 21 investigaram o efeito da radiação magnética em tumores em camundongos injetados com células de ascite de sarcoma. Sarcomas se formaram 4 a 5 dias após a inoculação. Os camundongos foram expostos a campos magnéticos de gradiente pulsado de 0,6 a 2,0 T com um gradiente de 10 a 200 T/m, largura de pulso de 20 a 200 ms e frequência de 0,16 a 1,34 Hz por 15 minutos diariamente por 28 dias, 21 momento em que os camundongos foram sacrificados. O peso médio do tumor dos animais tratados foi de 1,40 ± 0,81 g, comparado com 2,45 ± 0,95 para os animais de controle, uma diferença estatisticamente significativa. A microscopia mostrou necrose extensa em seções do tumor e evidência associada de apoptose em amostras de animais tratados.
As inúmeras diferenças na forma de onda, intensidade, duração da exposição e avaliação da resposta impedem a comparação direta entre os resultados dos estudos atuais e anteriores. 3 , 5 , 9 , 10 , 11 , 17 - 21 Independentemente disso, em cada caso o resultado pareceu ser uma redução relativa no tamanho do tumor, provavelmente por citorredução, e o aparecimento de necrose tumoral. Com base nesses e em outros estudos associados, a apoptose parece desempenhar um papel importante, e uma propriedade antiangiogênica dos campos pode ser fortemente suspeita. Para investigar os possíveis mecanismos de morte celular nos tumores, incluindo a apoptose, realizamos ensaios TUNEL em seções de tumor de nossos camundongos. Nossos resultados indicam que a apoptose pode ter desempenhado um papel na morte celular nos tumores ( Figura 4 ). Um estudo anterior 3 indicaram que campos magnéticos podem suprimir o crescimento do tumor suprimindo a angiogênese e bloqueando o suprimento de sangue para os tecidos tumorais. Especulamos que a morte celular e a necrose vistas nos tumores de nossos camundongos podem ser devido ao efeito combinado da supressão da angiogênese, bloqueio do suprimento de sangue para os tecidos tumorais e morte celular devido à apoptose.
Estudos anteriores 3,4 não relatam morbidade ou mortalidade ou anormalidades em tecidos normais devido à exposição a campos magnéticos. Em nosso estudo, camundongos expostos a campos magnéticos por 60, 180 ou 360 min diariamente não apresentaram nenhum sinal de doença clínica e/ou perda de peso (dados não mostrados). Os tecidos coletados desses camundongos na necropsia não apresentaram nenhuma anormalidade macroscópica ou histopatológica ( Figura 5 ). Essas descobertas apoiam a probabilidade de que a exposição ao campo magnético não seja prejudicial à saúde geral dos camundongos.
Em suma, relatamos que a exposição direta de camundongos a campos magnéticos reduziu o crescimento e a progressão do tumor. Camundongos expostos a campos magnéticos por 360 min diariamente por até 4 semanas apresentaram extensas áreas de necrose em seus tumores. Camundongos no grupo de controle não exposto desenvolveram tumores grandes. Além disso, o tempo de exposição desses tumores a campos magnéticos é crítico. Camundongos expostos por períodos mais curtos (ou seja, 60 ou 180 min diariamente por semana) não apresentaram redução no tamanho ou crescimento do tumor. A principal fraqueza do nosso estudo foi o pequeno número de animais usados em cada grupo. Nosso objetivo era realizar um estudo preliminar para avaliar os efeitos dos campos magnéticos no crescimento e viabilidade do tumor. Além disso, queríamos otimizar o tempo e a duração da exposição ao campo magnético. Relatórios anteriores 2 , 3 , 7 , 15 , 17 nos levam a levantar a hipótese de que tempos de exposição muito maiores, por vários meses, devem ser tentados.
Nossas descobertas, juntamente com os relatos de outros, apoiam uma exploração mais aprofundada do potencial dos campos magnéticos em terapêuticas contra o câncer, seja como terapia adjuvante ou, em alguns casos específicos ainda a serem determinados, como terapia primária. Em particular, tempos de exposição prolongados e diferentes intensidades de campo e formas de onda devem ser explorados.
Agradecimentos
Agradecemos ao Professor Bernard Veyret da Universidade de Bordeaux, França, que nos emprestou o ímã usado para este estudo. Também agradecemos a Rebecca Yerkey, Elisa Luna, Dawn McKenna, Theresa Alexander e Leisha Alexander por fornecerem excelente suporte técnico veterinário.
